Quá trình tổng hợp rosoxacin bắt đầu bằng quá trình tổng hợp pyridin Hantzsch biến đổi sử dụng làm thành phần ammonium axetat, hai chất tương đương của methyl propiolate và một trong 3-nitrobenzaldehyd. Oxy hóa dihydropyridine (2) bằng axit nitric sau đó xà phòng hóa, khử cacboxyl hóa và khử nhóm nitro bằng sắt và axit HCl tạo ra anilin 3. Điều này trải qua chuỗi phản ứng Gould-Jacobs cổ điển với este methoxymethylenemalonate để tạo thành vòng 4-hydroxyquinoline, sau đó kiềm hóa bằng ethyl iodua và xà phòng hóa este để hoàn thành quá trình tổng hợp chất kháng khuẩn rosoxacin (4).